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流式细胞术的发展意义重大

点击次数:565 发布时间:2019-03-14
流式细胞术 (Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理,同时利用荧光染料,激光技术,单抗技术以及计算机技术的发展,大大提高了检测速度与统计性,而且从同一个细胞中可以同时测得多种参数,为生物医学与临床检验学发展提供了一个全新的视角和强有力的手段。
 
  FCM在生命科学中的应用,标志着细胞生物学、肿瘤学、免疫学等进入了细胞和分子水平的研究。为从微观认识细胞及横向比较特征提供了精密、准确的方法和仪器。
 
 
  1、流式细胞仪系统流程:
 
标本→激光系统→流动系统→信号处理系统→放大系统→计算机系统→结果打印
 
  2、基本原理:
 
  待测标本制备成单细胞悬液通过荧光染色后进入充满鞘液的流动室,鞘液压力与样品流压力是不同的,当二者的压力差异达到一定程度时,鞘液裹挟着样品流中细胞排成单列逐个经过激光聚焦区。如果我们将细胞中感兴趣的部分特异性的标上荧光染料,那麽这些染料将在细胞通过激光检测区时受激光发出特定波长的荧光,通过一定波长选择通透性的滤色片,我们可将不同波长的散射光、荧光信号区分开来,并送到不同的光电倍增管中,经过一系列的信号转换、放大,数字化处理,我们就可以在计算机直观的统计染上各种荧光染料的细胞各自的百分率。选择不同的单克隆抗体及荧光染料,我们可以利用FC同时测定一个细胞上的多种不同特征;如果对具有某种特征的细胞有兴趣,我们还可以利用流式的分选功能将其分选出来,以便进一步培养、研究。
 
  3、意义:
 
  FCM与单克隆抗体结合,可对细胞表面和细胞内抗原、癌基因蛋白及膜受体进行定量检测,成为临床检验与研究的重要指标。流式免疫荧光技术不仅能将表达位点的细胞群区分开来,而且还能进一步区分各细胞亚群。对免疫功能障碍、造血系统疾病及恶性肿瘤的研究、诊断、治疗和预后评估都能起到重要作用。
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