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贝克曼库尔特超速流式细胞分选系统有哪些应用

点击次数:541 发布时间:2019-03-26
      MoFlo XDP超速流式细胞分选系统可对复杂样本中的细胞进行鉴定、分类、定量和分离,单次可同时对其中一种到四种特定细胞进行超高速分选纯化、高通量单克隆分选或细胞芯片制备。分选后的细胞能直接用于培养、移植、核酸提取、单细胞PCR扩增或原位杂交等,可进一步进行细胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同细胞之间的差异化研究。硬件中样本细胞丢弃的比例低于5%,保证样本中目标细胞的高回收率,特别适用于干细胞等极低含量的细胞研究。

      MoFlo XDP可运对各种真核和原核细胞、植物细胞、微生物、浮游生物等进行检测及分选。专为要求高产量、生物安全性和需要便捷的软件分析系统的研究者而设计。

一.稀有细胞应用
标记CFSE后通过尾静脉移植入受者小鼠体内,提取受者小鼠脾脏细胞进行移植细胞检测。总共检测2293万个细胞,发现移植细胞已经进行6代增殖。R7,R8,R9分别为第5,第4,第3代移植细胞,含量分别在万分之一左右。含量约为1/10万的CD133阳性细胞,分选后直接注射裸鼠皮下进行成瘤实验。

二、低含量,连续表达细胞同时进行高速四路分选

三、肿瘤干细胞检测
    肿瘤干细胞通常缺乏特异性标记,含量又很低,所以很难被检测到。肿瘤干细胞和普通肿瘤细胞相比,细胞膜含有有泵动功能的ABC等蛋白家族,是肿瘤耐药和复发的决定性因素,因此对肿瘤干细胞的研究具有重要意义。
    利用其细胞膜的泵动功能,以小分子活性染料Hoechst33342对肿瘤样本进行平衡染色,可以检测到因为泵出Hoechst33342而着色较少的侧群细胞(SP,Side Population),此即为肿瘤干细胞。利用泵蛋白抑制剂Verapami同时染色,可以看到侧群细胞比例明显减少或全部消失,能确认SP细胞的位置。其它干细胞,如间充质干细胞、造血干细胞、神经干细胞、各种成体干细胞等都可以用这种方法来进行筛选。分选出SP细胞群和非SP细胞群,可以研究基因和蛋白表达差异、致病机理、药物筛选等生命科学的重大课题。

四、染色体/精子分析分选
    MoFlo/ MoFlo XDP高精度信号分辨能力(液流稳定、激光/电子系统/PMT噪音低/运算速度快)和高活性收获细胞(系统清洁度好)的功能在染色体和精子分选中得到的表现。对牛精子分选进行人工授精生产小奶牛在畜牧业上有很大的经济效益,MoFlo/ MoFlo XDP是可以进行这个应用的分选流式细胞仪,在国内有30台MoFlo在日夜运转进行商业分选。
    不同染色体之间的DNA含量差异很小,普通的DNA染料无法区分23对染色体。利用高功率355nm紫外激光激发的HOECHST 33258和高功率458nm激光激发的CA3分别对染色体的DNA进行染色。不同的染色体因其G-C/A-T碱基对的比例不同而被分离开,选中任何一条染色体设门后即可进行高纯度分选。染色体分析分选可以应用在高精度FISH、染色体移位、基因定位、染色体序列测定、染色体相关蛋白分析等。

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