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如何修|炼成流式高手 -方案设计(上)

点击次数:155 发布时间:2020-08-27

 

我们时常会遇到,明明染色Marker都来自一篇文献,但是最后实验结果却变成“买家秀与卖家秀”。

 

 

产生这种现象的原因是什么?以及我们为什么要如何优化我们的染色方案呢?我们先看具体的例子。

 

 

方案1与方案2,所选择的marker都完全一致,所选用的荧光素种类一样,但是搭配不一样。那么我们看看同一个样本,最后各个细胞亚群的结果一样吗?

 

 

方案1与方案2,CD4+CD25+ 的百分比接近(A与C比较),可是CD8+CD69+的百分比却相差很多(C与D比较)。

 

造成这种原因其实就是我们平时说到到spreading现象。

 

 

Nguyen, Richard, et al. "Quantifying spillover spreading for comparing instrument performance and aiding in multicolor panel design." Cytometry Part A 83.3 (2013): 306-315.

 

如果要优化流式染色方案中,由spreading现象产生的分辨率降低,我们可以使用SWOFF方法。通过如下流程,就可以很快找出究竟是由于那个通道的配色不合理,导致分辨能力下降。

 

 

 

在不同的检测平台,元件的光电转化效率会直接影响仪器总体分辨率。

 

 

不仅如此,科技的进步带来的还有更小的spreading现象,这使得配色也更加的轻松,结果也更加的准确。

 

 

你想知道如何检查自己的染色方案么?利用SWOFF的方法,可以帮您发现并且优化,使检测更加准确。点击下方阅读全文,获取SWOFF的详细步骤。 

 

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