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如何修|炼成流式高手 - 样本检测

点击次数:100 发布时间:2020-10-29

 

 

 

  

   

新建自动补偿实验

 

 

 

问题来了,为什么调电压就的重新补偿?

 

荧光补偿的目的就是消除荧光溢漏对数据分析的复杂性,保证检测结果的准确性。从下面公式(以FITC溢漏到PE通道为例)可以看出,荧光溢漏(补偿)的大小和平均荧光强度有直接关系,电压gain值的大小又影响着MFI的大小。故电压Gain的大小会直接影响荧光补偿值的大小。

 

Tips:补偿调节时要注意:使用未染色的细胞做PMT的电压设置;不要使用未染色的补偿微球设置电压

 

 

 

CytoFLEX 支持在线及脱机调补偿。多色应用中,增加新的单染管到先前保存的补偿实验中,轻松实现全新补偿矩阵的建立。并支持增益设置改变后,补偿值自动进行修改,因此无需手动调整补偿。

 

在线根据增益转换补偿矩阵

 

QQ截图20201026114754.png

 

从补偿库导入补偿值-工作流程:

640 (6).png

从补偿文件导入补偿值:

 

 

检测线性与补偿

CytoFLEX平台实测荧光强度与对应检测器增益设定值呈线性关系。调整增益时,软件自动实时重新计算溢出值。半导体工艺可高度重现,因此CytoFLEX平台的实测荧光强度与对应检测器的增益设置成线性关系。而基于PMT检测的非线性意味着需要根据经验来确定电压。

 

 

QQ截图20201029120020.png

 

 

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