您好,欢迎进入贝克曼库尔特国际贸易(上海)有限公司网站!
一键分享网站到:
产品列表

—— PROUCTS LIST

技术文章Article 当前位置:首页 > 技术文章 > 【超离应用】快速密度梯度形成技术,优化病毒载体纯化流程

【超离应用】快速密度梯度形成技术,优化病毒载体纯化流程

点击次数:191 更新时间:2024-05-30


01

技术背景


随着现代生物医学研究的不断深入,病毒载体作为一种强大的工具,在基因治疗和基因编辑等领域发挥着至关重要的作用。然而,病毒载体的纯化过程往往耗时且复杂,这在一定程度上限制了相关研究的进展。今天,我们就来探讨一种全新的方法——利用VTi 90垂直转子与CsCl(氯化铯)密度梯度离心技术,来加速病毒载体的纯化过程,提高实验效率。



02

方法介绍


研究团队通过使用VTi 90垂直转子和Optima XPN超速离心机,结合CsCl密度梯度离心技术,对病毒载体纯化过程进行了优化。通过多段离心,调整离心速度和离心时间,实现了在更短时间内达到密度梯度平衡的目标。






03

实验过程


在实验中,研究团队首先将病毒载体样品与CsCl溶液混合,然后将其加入Quick-Seal热封管中。再使用VTi 90转子进行离心,通过调整离心速度和离心时间,使样品在离心管内形成稳定的密度梯度。离心结束后,通过分馏的方式收集不同密度的样品组分,并使用折射仪测量各组分并绘制密度梯度曲线。通过比较不同实验步骤的密度梯度曲线,找到与旧步骤密度梯度曲线相同的实验条件,确保了样品条带位于相同位置。


【超离应用】快速密度梯度形成技术,优化病毒载体纯化流程

离心结果示意图:


【超离应用】快速密度梯度形成技术,优化病毒载体纯化流程





04

实验结果


基于 Optima XPN超速离心机对于分段离心步骤设置的支持(在一次运行中运行多个转速步骤),研究团队最终找到了一种能够在80分钟(50+30分钟)内达到密度梯度平衡的优化方案,较之前16小时的旧步骤提升了近12倍效率。


【超离应用】快速密度梯度形成技术,优化病毒载体纯化流程



  1. 以更高的速度开始分离可以帮助更快地形成密度梯度。

  2. 将运行速度降低足够长的时间可以:

  • 与现有的(较慢的)步骤获得相同的效果,将目标条带保留在相同的位置。

  • 平坦化密度梯度曲线,可提供更高的条带分辨率。





05

结语


加速密度梯度形成、优化病毒载体纯化效率是一项具有重要意义的研究工作,不仅为病毒载体纯化领域带来了新的突破,也为广大科研工作者提供了更高效、更便捷的实验方法,从而降低了实验成本和时间成本,为相关领域的研究提供了有力支持!

如果您对以上方案感兴趣,不妨看看相关离心产品,以下组合搭配即助您轻松实现病毒载体纯化流程:



【超离应用】快速密度梯度形成技术,优化病毒载体纯化流程



Optima X系列智能型超速离心机



Optima XPN系列配备益于初学者操作的 eXpert 智能软件程序,同时为密度梯度离心等方法提供强大支持。产品还具有增强型数据管理功能,支持客户 GMP 流程。

主要型号:Optima XPN-100 / 90 / 80

基础型号:Optima XE-100 / 90

最大转速(rpm):100,000 / 90,000 / 80,000

最大相对离心力(xg):802,000 / 694,000 / 548,300



【超离应用】快速密度梯度形成技术,优化病毒载体纯化流程



Vti 90垂直转子



Vti 90垂直转子,最大相对离心力可达到645,000xg,最大转速下K因子低至6。分离沉降系数约为60s的空壳AAV颗粒,仅需80min,为分离病毒颗粒的理想选择。

  • 最大RPM:90 ,000

  • 最大RCF:645,000 xg

  • K因子:6

  • 离心管数量/体积/大小/尺寸:

▪ 8 x 5.1mL

▪ ½ x 2 in

▪ 13 x 51 mm

  • 转头容量:40.8mL



【超离应用】快速密度梯度形成技术,优化病毒载体纯化流程


更多产品信息点击查看:小贝学习中心—产品指南





版权所有 © 2024 贝克曼库尔特国际贸易(上海)有限公司  ICP备案号: