流式细胞术在自身免疫疾病中的应用

自身免疫性疾病（autoimmune disease，AID）是指由于某些原因造成免疫系统对自身成分的免疫耐受减低或破坏，致使自身抗体或/和致敏淋巴细胞损伤自身器官组织而引起的疾病，表现为相应组织器官的功能障碍。临床上常将AID分为器官特异性和全身性（或系统性）两类。

• 器官特异性常见的有：强直性脊柱炎、I型糖尿病、炎症性肠病、多发性硬化症、自身免疫性肝炎等，所谓的器官特异性都是相对的，这些疾病也常会伴发多个组织、器官的损伤；

• 系统性常见的有：系统性红斑狼疮SLE、硬皮病、干燥综合症、类风湿性关节炎RA等。

自身免疫疾病的主要药物治疗还是依靠激素和生物制剂通过阻断关键炎症性细胞因子或细胞表面分子，如常见的肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 抑制剂（阿达木单抗）、白细胞介素-6受体 ( IL-6R) 抑制剂、选择性T细胞共刺激调节剂以及其他生物制剂如CD20靶向药物（利妥昔单抗）等。

免疫反应调节异常TH细胞和T抑制细胞（TS）对自身反应性B细胞的调控作用十分重要，当Ts细胞功能过低或TH细胞功能过度时，则可有多量自身抗体形成，出现过量的自身抗体，会诱发自身免疫性疾病。

流式细胞术在自身免疫相关疾病的精准诊治中发挥重要作用，通过对免疫细胞的检测来评估机体整体的免疫状态和功能，检测疾病发病和治疗相关的靶点从而为早期诊治、个性化治疗、指导用药剂量和疗程、病情和预后监测提供重要指标和参考依据。

TBNK细胞是外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞亚群的简称，这些细胞是机体免疫功能的重要指标之一，主要用于免疫系统疾病及免疫相关疾病诊断和治疗的临床监测。自身免疫疾病发病、进展以及治疗过程中常伴随着 TBNK淋巴细胞数量、比例和功能上的变化。TBNK淋巴细胞亚群检测能反映机体当前的免疫状态，辅助疾病诊断，同时对分析疾病的发病机制、B细胞清除疗效评估、副作用及预后监测提供参考依据。

HLA-B27属于I型MHC抗原分子，为HLA-B类分子，表达于机体所有有核细胞表面，其中淋巴细胞表面含量丰富。HLA-B27与许多疾病呈强相关，尤其是强直性脊柱炎 (Ankylosing Spondylitis, AS) ，此外还有银屑病关节炎，Reiter’s综合征，反应性关节炎，炎症性肠病性关节炎等。

在2019年发布的《中轴型脊柱关节炎诊断和治疗的专家共识》中提到，HLA-B27阳性已列为中轴型脊柱关节炎 (axial SpA，ax-SpA) （包括强直性脊柱炎 (ankylosing spondylitis，AS)）的诊断标准之一。AS早期其发病隐匿，症状多样，腰腿痛及晨僵症状与多种疾病类似，容易误诊。因此HLA-B27检测对AS进行早期诊断、治疗就有非常重要的意义

流式细胞仪使用FSC/SSC圈定淋巴细胞，检测淋巴细胞表面HLA-B27抗原表达强度和百分比，同时检测HLA-B7排除同属交叉反应的干扰。

T淋巴细胞起源于骨髓，然后转移到胸腺中发育成熟，是机体免疫细胞中数目最多、功能最复杂的一类细胞。

流式细胞分析仪FCM根据淋巴细胞表面标志的不同来检测T淋巴细胞亚群：初始T细胞（CD45RA+CD27+）、中央记忆T细胞（CD45RA-CD27+）、效应记忆T细胞（CD45RA-CD27-）、终末分化效应记忆T细胞（CD45RA+CD27-）、活化亚群（CD38+）、衰老耗竭亚群（PD1,CD57,CD28）等。通过T淋巴细胞亚群的监测可以了解在不同疾病状态下患者的细胞免疫功能状态，已经广泛在肿瘤、自体免疫、感染性疾病中,辅助临床诊断、帮助了解发病机理、判断预后和指导临床治疗。若外周血中T细胞总数或不同T细胞亚群的绝对数和比值发生改变,可视为免疫异常。

B淋巴细胞是在骨髓内发育成熟的细胞，其表面分化抗原十分复杂，通过识别抗原、与免疫细胞和免疫分子相互作用，这些表面抗原在B细胞的增殖分化和功能发挥中起着重要的调节作用。根据表面抗原表达量的不同，B细胞可分成不同亚群。大部分发挥效应功能的B细胞在体内存活的时间较短，仅数天至数周，但其记忆细胞在体内可长期存在。异常B细胞识别自身抗原，并分泌攻击自身组分的抗体时，可能导致自身免疫病。与B细胞异常相关的自身免疫病包括硬皮病、多发性硬化、系统性红斑狼疮、1型糖尿病和类风湿性关节炎等。

B淋巴细胞精细亚群检测项目可以全面分析B淋巴细胞的后期成熟阶段，从而帮助我们准确了解自身的体液免疫状态，可以更好地指导临床治疗，对病情判断和临床治疗和观察是有一定价值的参考指标。