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从培养细胞制备到最终产物纯化,高速冷冻离心机扮演着重要角色

点击次数:95 更新时间:2025-09-26
从培养细胞制备到最终产物纯化的全流程中,高速冷冻离心机扮演着重要角色。

1. 细胞培养阶段
细胞收获:从培养瓶/皿中收集贴壁或悬浮细胞,通过低速离心(1,000-3,000 rpm)浓缩细胞。
细胞清洗:用PBS或培养基重悬细胞后离心,去除残留血清或代谢废物。
细胞分选:结合密度梯度离心,分离特定细胞亚群(如淋巴细胞分离)。
2. 细胞裂解与产物释放
裂解液离心:细胞裂解后,通过高速离心(10,000-15,000 rpm)分离可溶性产物(如蛋白质、核酸)与不溶性碎片。
低温保护:冷冻功能防止裂解过程中释放的蛋白酶降解目标产物。
3. 产物纯化阶段
沉淀分离:通过调节pH或加入盐析剂(如硫酸铵)使目标产物沉淀,离心后收集沉淀。
超速离心纯化:结合密度梯度介质(如CsCl梯度),分离病毒颗粒、外泌体等纳米级颗粒。
缓冲液置换:通过离心浓缩产物并置换为储存缓冲液(如PBS),去除杂质。
4. 质量控制
纯度检测:离心后取上清或沉淀进行SDS-PAGE、Western Blot或HPLC分析。
浓度测定:通过离心浓缩调整产物浓度至实验所需范围。

高速冷冻离心机通过高速旋转(通常达10,000-20,000 rpm)产生离心力,结合低温环境(可降至-20℃至-40℃),实现以下功能:
 
细胞分离:利用密度差异分离不同细胞类型(如活细胞与死细胞、贴壁细胞与悬浮细胞)。
细胞碎片清除:通过离心去除裂解后的细胞膜碎片、核碎片等杂质。
产物沉淀:在低温下降低蛋白质、核酸等生物大分子的溶解度,促进其沉淀。
梯度离心:结合密度梯度介质(如蔗糖梯度),分离特定细胞器或病毒颗粒。

产品优势:
 

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  • 平稳的加/减速程序

  • 保护样本免受干扰

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  • 蛋白质浓缩

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