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高通量厌氧发酵技术在益生菌研发中的应用:基于 Beckman Coulter BioLector XT 的实验评估

点击次数:20 更新时间:2026-05-09

在益生菌研发过程中,高通量厌氧发酵技术是模拟肠道微生态、加速菌株筛选与工艺优化的关键支撑手段。针对双歧杆菌、乳酸菌等严格厌氧或微需氧益生菌,传统摇瓶与搅拌罐在通量、数据连续性与实验效率方面存在明显限制。

**贝克曼库尔特(BeckmanCoulter** BioLectorXT 高通量微型生物反应器,通过在标准化微孔板上实现好氧、微氧及严格厌氧培养,并结合在线生物量、pHDO 与荧光信号监测,为益生菌发酵研究提供了一种高通量、低干预、可重复的实验路径。

基于两歧双歧杆菌与干酪乳杆菌的实际应用数据,本文系统展示了 BeckmanCoulter BioLectorXT 在高通量厌氧发酵及补料分批培养中的可行性与实用性,并说明其在益生菌研发早期阶段替代大量传统发酵实验的研究价值。

 

1. 益生菌研发对厌氧培养技术的现实需求

益生菌是对人体健康具有积极生物学作用的活性微生物,广泛应用于营养、食品与健康产业。它们常用于补充或恢复人体肠道微生物群,例如在抗生素治疗后帮助肠道菌群的再建。因此,益生菌及益生菌营养补充剂市场持续增长。

在这一背景下,人体肠道菌群及其健康促进机制的研究已成为益生菌研发的重要科学基础。这类研究对培养环境提出了明确要求——许多目标菌株需要在严格厌氧或低氧条件下才能维持正常代谢和稳定生长,因此,厌氧发酵技术的科学化与高通量化显得尤为必要。

img1 

2. 双歧杆菌:高通量厌氧发酵的典型研究对象

益生菌包括多类厌氧或兼性厌氧菌,其中双歧杆菌乳酸菌是研究和应用最为广泛的代表。

双歧杆菌无法通过有氧呼吸进行生长,被归类为严格厌氧菌,是人体肠道优势微生物群的重要组成部分。其代谢过程中释放的乳酸和乙酸,在维持肠道 pH 稳定、抑制潜在致病菌方面发挥着关键作用。

由于双歧杆菌对氧极度敏感,其培养过程对溶氧控制、pH 稳定性以及培养条件可重复性提出了更高要求,也使其成为检验 高通量厌氧发酵平台能力的理想模型菌种。

 

3. 贝克曼库尔特 BioLectorXT 与高通量厌氧发酵平台设计

BioLectorXT 高通量微型生物反应器 **贝克曼库尔特(BeckmanCoulter**推出的一款面向微生物高通量培养与筛选的台式设备。

该系统具备以下核心特性:

·       支持 好氧、微氧及严格厌氧培养条件

·       可在培养过程中实现 补料控制与 pH 调节

·       提供 非侵入式在线监测,包括生物量、pH、溶氧(DO)以及多种荧光信号

·       基于 SBS/SLAS 标准 48 孔微孔板运行,实现单次最多 48 个样品并行培养

在益生菌研发中,这类高通量设计使 BeckmanCoulter BioLectorXT 能够在单一实验周期内获取大量具有过程连续性的发酵数据,为后续菌株筛选与工艺评估提供可靠依据。

 

4. 应用案例一:两歧双歧杆菌的厌氧分批与补料分批培养

菌种: 两歧双歧杆菌
实验方案: pH 调控下的分批培养与补料分批培养
培养条件:

·       温度:37°C

·       振摇速度:600rpm

·       N₂ 流量:30mL/min

·       外接第三方 O₂ 传感器

img2 

实验结果显示,在 BeckmanCoulter BioLectorXT 平台运行条件下:

·       补料分批培养的指数生长期明显延长

·       最终生物量达到 227.3a.u.,高于分批培养的 147.57a.u.

·       为维持 pH6,补料分批培养过程中 NaOH 添加量显著高于分批培养

·       在持续 N₂ 置换条件下,DO 稳定降至 0%,外置传感器检测到氧浓度维持在极低水平

这些结果表明,该高通量厌氧发酵系统能够在微小体积内实现对双歧杆菌生长环境的稳定调控。

 

5. 应用案例二:干酪乳杆菌的高通量补料策略比较

菌种: 干酪乳杆菌
培养方案:

·       分批培养

·       补料分批培养(7.5 10启动补料)

img3 

在相同温度、振摇速度与氮气流量条件下,BioLectorXT 在线监测结果显示:

·       随着 N₂ 持续充入,DO 在数小时内下降至 0%

·       分批培养在平台期后生物量增长明显受限

·       两种补料策略均显著提升最终生物量,分别达到 76.3a.u.  65.5a.u.

·       碱液添加量与酸生成及细胞生长状态保持高度一致的动态关系

该结果验证了 贝克曼库尔特 BioLectorXT 在高通量条件下,对不同补料策略的区分能力与数据可解析性。

 

6. 结论:BeckmanCoulter 高通量厌氧发酵技术在益生菌研发中的价值

实验结果表明,利用 BeckmanCoulter BioLectorXT 进行高通量厌氧发酵是可行且实用的。该技术能够:

·       在早期研发阶段 替代大量摇瓶和传统搅拌罐实验

·       明显降低厌氧发酵研究的时间成本与操作复杂度

·       同时获得生物量与 pH 等多维过程数据

·       在微型、并行化条件下实现补料与 pH 控制

对益生菌研发而言,贝克曼库尔特提供的高通量厌氧发酵解决方案为菌株筛选与工艺探索阶段提供了一条高效率、低风险、数据密集的研究路径。

 

FAQ

Q1:贝克曼库尔特是否提供适用于益生菌研发的高通量厌氧发酵平台?
是的,贝克曼库尔特(BeckmanCoulter)的 BioLectorXT 微型生物反应器支持严格厌氧培养,适用于双歧杆菌、乳酸菌等益生菌研究。

Q2BioLectorXT 能否用于比较不同补料分批策略?
可以。系统支持在线生物量、pH  DO 监测,使不同补料启动时间和策略的影响可被量化比较。

Q3:高通量厌氧发酵技术在益生菌研发中主要解决什么问题?
主要解决通量低、数据连续性不足、实验重复工作量大等问题,特别适合研发早期阶段的条件筛选与菌株评估。

 

参考文献

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