自动化移液工作站，助力抗体表征自动化

CE-SDS纯度分析是用于药物纯度、完整性和稳定性分析的金标准。从抗体药物筛选，到生产工艺研究到产品上市放行等不同阶段均需要进行大量的CE-SDS纯度实验。通过贝克曼库尔特生命科学Biomek i5自动化移液工作站完成样品前处理及缓冲液添加过程，在SCIEX高通量毛细管电泳系统BioPhase™ 8800上进行样品分离和数据分析。

传统流程中确定抗体聚集水平需要六个小时时间，而Valita Aggregation Pure试剂盒搭配Biomek系列移液工作站，基于96孔板，搭配荧光偏振功能酶标仪，在短短的15分钟内便可获得抗体聚集数据，用于早期大量样本初筛。

Valita Aggregation Pure测定使用简单的添加、混合、读取，使其非常适合使用液体工作站（如Biomek i5或i7）进行高通量聚集分析。在这种情况下，我们开发了自动化Valita聚集纯测定方法，使用Biomek i7移液工作站自动进行液体处理转移（包括标准曲线制备和样品浓度归一化）、孵育、板转移，在BioTek Cytation 1酶标仪（安捷伦）上进行数据读取与分析。

对于Valita Aggregation Pure分析的准确性，我们与HPLC-SEC进行了对比。Valita Aggregation Pure通过% HMWS（高分子量物质百分比）HPLC-SEC相当的排名能力，样品从聚集程度最高到最低呈现趋势。

基于Biomek i7移液工作站的Valita Aggregation Pure检测方法，加速了细胞系筛选和工艺开发工作流程。通过将纯化的样品添加到孔板中，室温下孵育，并使用酶标仪来检测，可在15分钟内定量聚集。我们以96孔板的形式提供该产品，浓度200-2000mg/L已经验证，1000mg/L时检测限为0.5%。该方法无需大量系统维护或数据分析即可提供高度可重复的结果，同时使用户能够大幅减少需要更深入分析（SEC-HPLC）的样本数量。该工具支持快速排除高度聚集的样本，有助于更快地选出最佳质量的克隆。

监测杂质是确保单克隆抗体等治疗药物成功开发的关键。蛋白质A纯化是一种常见的降低杂质方法。然而，这种纯化方法在最终药物产品中存在蛋白质A交叉污染的风险。因此，对于生产旨在获得监管批准的纯药物产品而言，检测蛋白质A的方法至关重要。常用的方法是免疫测定法，旨在检测低水平的蛋白质A杂质。

本案例介绍了Biomek i7移液工作站，利用Cygnus Technologies, Inc.的试剂盒进行蛋白质A ELISA检测。该自动化ELISA旨在实现高样本通量、样本处理的灵活性和一致的高质量数据。

我们使用Biomek i7移液工作站进行样本稀释、试剂添加等操作，集成自动洗板机进行实验板清洗、孵育盒进行孵育、酶标仪进行吸光度测定。

在Biomek i7移液工作站上自动运行蛋白A的浓度测定方法。通过手动与Biomek液体处理器获取的数据具有可比性，且无统计学显著差异，这表明自动化方法可以成功替代手动方法。并且，基于Biomek i7移液工作站的多通道移液器和灵活八通道移液器，可以轻易实现其他ELISA流程的自动化。