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单细胞分选及基因组研究、外泌体或细胞外微囊泡成为热点议题

点击次数:864 发布时间:2017-07-13

一年一度的CYTO大会作为流式细胞学领域zui高水平的学术盛会,今年于6月10日-14日在美国波士顿市的海因斯会展中心隆重举行。CYTO2017是由国际流式细胞学会 (ISAC) 举办的第32届国际流式细胞学促进会,旨在通过各领域从事细胞学研究的工作者的经验交流,促进细胞学研究的共同发展。CYTO不仅有世界各地的专家学者与参会者分享流式细胞学的应用进展,而且各大流式技术服务供应商也会纷纷展示的流式相关产品。
 


 

贝克曼库尔特公司一直是流式细胞检测技术的先行者,作为此次CYTO2017的展商,贝克曼库尔特公司展示了6激光21色的CytoFLEX LX新型流式细胞分析仪与其他CytoFLEX系列家族的产品,为未来多色流式分析与微颗粒检测等应用提供更完善的解决方案。
 


CYTO大会的会议内容涉及到流式细胞学应用的方方面面,涵盖从新技术的开发、科研进展及临床检测等领域。在丰富多彩的会议议题中,单细胞分选及基因组研究、外泌体和细胞外囊泡是今年的热点。众多研究者都介绍了他们各自在这些领域的研究。


越来越多的研究者关注单细胞分选及其基因组研究是因为研究认为多细胞生物在细胞水平上内在就具有异质性,因此,为了真正了解生物系统的功能,需要进行单细胞水平的分析。过去由于技术上的不足,完成单细胞水平的分析几乎是不切实际的,但zui近几年有效的单细胞分析方法已经突破了技术瓶颈,可以将分析的分辨率从整个组织转到个体细胞的水平,这些方法可以帮助研究者深入了解个体细胞的功能性质,进一步了解免疫、神经系统疾病以及癌症的机理。微液流分选及流式细胞分选是目前研究者们采取的单细胞分选的主要方式。通过微液流分选系统可以用油滴将细胞与RNA杂合微球包裹住之后,完成细胞裂解以及反转录后即可进行基因测序和分析的工作。
 


与低速并且只能进行单一群细胞群分选的微液流分选相比,流式细胞分选可以在进行细胞分析的同时将单细胞分选至微孔板中进行后续基因测序的相关研究,并且MoFlo Astrios EQ等具有Index Sorting的流式细胞分选仪可以回溯单细胞所处于细胞群的具体位置,可以更有效的将蛋白表达及基因组学的信息进行整合分析。

外泌体或细胞外微囊泡(EV)等微颗粒作为近年来的研究热点,自然也在CYTO大会上被频繁提到。许多学者认为外泌体或微囊泡是细胞与细胞间进行长距离通讯的必不可少物质。它们可用作不同化合物的载体,包括蛋白质、脂质和核酸。病原体在微颗粒释放方面表现突出,可以在变化过程中调节细胞通讯,特别是在操纵宿主反应方面。外泌体或微囊泡的大小范围在100nm至1mm之间,很难进行检测和鉴定。传统的方法是通过差速超速离心和大小排阻色谱分离EV,再进行后续的高分辨显微镜,蛋白提取或RNAseq等检测。但也有研究者用高分辨率空气激发流式分选仪(MoFlo Astrios EQ)进行EV分选,MoFlo Astrios EQ的增强型双前向角设计可以有效区分出噪音与100nm微小颗粒间的差异。分选后还可以用新一代的雪崩光电二极管(APD)流式比如CytoFLEX,NanoFCM进行蛋白表达的分类分析。

贝克曼库尔特在CYTO2017上新展出的6激光21色 CytoFLEX LX新型流式细胞分析仪采用APD作为检测器,APD的光电转化效率比传统的PMT检测器更高,拥有更强的信号级联放大效应,因此比传统检测器更灵敏,可检测更小、更微弱的信号。与传统仪器使用488nm激光作为FS/SS信号的激发源相比,CytoFLEX LX可以选择波长更短的405nm激光作为激发源,获得的VSSc通道的信噪比更好,特别适用于进行小颗粒检测。

 

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