BLU新视野 | Jurkat细胞精准计数为何屡成瓶颈？

点击次数：64 更新时间：2025-08-22

Jurkat细胞是人急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）来源的悬浮细胞系，1970年代由Schneider建立。因保留了完整的T细胞受体（TCR）-CD3复合体及下游信号分子，它成为全球研究T细胞活化、信号转导、细胞因子分泌以及病毒转导效率的“黄金模型"。

Jurkat细胞直径约14–16 μm，呈悬浮生长，极易自发或剪切诱导，聚集成团；活细胞边缘折光性强，死细胞则迅速皱缩，台盼蓝染色显示为一深一浅，肉眼判断的主观误差较大，计数重复性低。此外，其核型复杂（假三倍体），在长期传代中可能出现亚克隆漂移，因此实验前需同步检定细胞活率、浓度及关键表面标记（如CD3、CD28）。

对于Jurkat细胞的精准计数一直是个难题。传统技术方法如血球计数板，只能选取部分视野，且人眼计数有限，因此，手动计数的误差通常＞15%，这对后续实验的结果以及实验整体的可重复性都带来了极大的影响。

为了应对这一计数难题，我们使用了Beckman Coulter Vi-CELL BLU细胞活率分析仪，调整并测试了Jurkat细胞计数的最佳参数，快速得到了较为精准，可重复的计数结果。

实验

在使用Beckman Coulter Vi-CELL BLU细胞活率分析仪时，大多数细胞可以使用默认的仪器设置进行分析。在某些情况下，某些细胞系可能需要修改这些分析参数。Vi-CELL BLU自带的软件允许用户直观且轻松地选择最佳的仪器设置，从而确保准确的结果。用于Jurkat细胞分析的仪器设置如下（图1）。

图1：用于Jurkat细胞计数时，Beckman Coulter Vi-CELL BLU细胞活率分析仪的参数设置

结果

Vi-CELL BLU细胞活率分析仪报告的结果如图2所示。细胞活率百分比和总Jurkat细胞浓度分别为91.5%和8.99 x 10^{^6} cells/mL。Vi-CELL BLU细胞活率分析仪还报告活细胞浓度、平均细胞直径、大小分布和平均细胞圆形度。每次测量技术的细胞图像也可以存档，以供将来重新分析。

图2：活细胞用绿色圆圈表示，非活细胞用红色圆圈表示

结论

对于高密度、易聚团或形态不均一的悬浮细胞系，Beckman Coulter Vi-CELL BLU细胞活率分析仪能够消除人为偏差，提升数据一致性并消除手动计数中固有的主观性，并且拍照多个视野，与手动计数相比，有≥10?的样本量来降低统计误差。此外，每次计数的结果都会输出可追溯图像，满足GLP要求。