流式细胞术助力T细胞淋巴瘤诊疗新突破！TRBC1/2应用解析

随着TRBC1/TRBC2的深入应用，有不少人还有一些困惑：

小编围绕大家的这些困惑，一起来展开探讨。

TCR是T细胞表面的特征性标志，根据TCR组成链的不同，可将T细胞分为αβ T细胞和γδ T细胞，其中αβ T细胞约占T细胞的95%~99%，γδ T细胞约占1%~5%。由于αβ T细胞占T细胞的绝大多数且重排率更高，目前流式主要通过对αβ T细胞的TCR的克隆分布检测来评估T细胞克隆性，主要有两种方案：TCR-Vβ受体库检测（检测TCR β链可变区 (TCR-Vβ) 受体的多样性）以及TRBC1/TRBC2检测（检测TCR β链恒定区结构域的抗体）。

在TCR基因重排过程中，T细胞受体的β亚基恒定区 (TRBC) 仅有两种多态性，即TRBC1或TRBC2，每个TCR以随机和互斥的方式不可逆地选择两个恒定区域中的一个进行表达，类似于B细胞κ和λ，为多克隆表达。与TCR-Vβ受体库相比，TRBC1/TRBC2检测是流式细胞评估T细胞克隆性更简单且更优的方法，当某一TRBC群体的表达比例大于85%或小于15%时，则提示单克隆性表达。

使用TRBC1/TRBC2分析作为初始筛查工具，评估T细胞克隆性。建议使用15%和85%作为统一的截断值。

通过评估T细胞骨架抗原表达来识别异常群体，然后再使用TRBC1/TRBC2评估克隆性。

有文献数据表明，69%的TRBC1（dim）病例为TRBC2阳性，因此TRBC1/2双染色在TRBC1（dim）病例中很有必要，以判断异常人群表达的是TRBC2还是下调的TRBC1。

对于表面CD3阴性的TRBC1/TRBC2细胞肿瘤，评估细胞内TRBC1/TRBC2很有价值。建议使用与表面染色相同的抗体组合，并在破膜后添加TRBC1/TRBC2。

相当比例的T细胞肿瘤表面不表达CD3，鉴于CD3和TRBC1/2的表达是相关的，且两者都是T细胞受体复合物的组成部分，而CD3阴性的成熟T细胞本身就是异常的，无需进行表面TRBC1/2。这时，可使用细胞内CD3和TRBC1/2进行克隆性评估。部分胞内TRBC2细胞可能表现出非常微弱的表达，与内部阴性对照细胞重叠，这个时候结果的解读尤需注意。

一项研究显示，在表面CD3阴性的T细胞中使用胞内CD3、TRBC1和TRBC2可以在大多数病例中得出结论；其中有13%的成熟T细胞淋巴瘤没有表达胞内TRBC1或TRBC2，包括部分T-PLL、PTCL、EBV阳性T细胞淋巴瘤及嗜酸性粒细胞增多综合征的淋巴细胞变异型等。

早期T细胞前体型T-ALL（ETP T-ALL）在胞质TRBC1和TRBC2中均为阴性，其诊断主要依赖于显示CD8和CD1a缺失、CD5微弱/阴性表达，以及表达未成熟和髓系标志物如CD11b、CD13、CD33、CD65、CD117、CD34或HLA-DR。因此T-ALL通常不需要常规评估TRBC1/TRBC2，更成熟的病例可能显示胞内TRBC1/TRBC2受限。

迄今尚无TRBC1/TRBC2双表达的恶性病例；如出现这双表达情况，需要确认是否存在试剂加样出现错误或污染、或电压补偿条件是否合适等。