【应用“泌”籍】特殊体液外囊泡超速离心纯化案例
特殊体液包括：尿液、泪液、脑脊液、消化液等。而细胞外囊泡（EV）存在于多种体液中，能反映来源组织的生理或病理状态，具有极大的潜力用于各类系统疾病诊断。特殊体液外囊泡的相关研究是生物医学领域的研究热点之一。
参考文献：
The potential roles of cigarette smoke-induced extracellular vesicles in oral leukoplakia.
那么，如何通过金标准的超速离心法
来纯化相应的特殊体液外囊泡了？
尿液样品
肾病综合征患者尿液的复杂成分会干扰尿细胞外囊泡的分离，因此需要额外的步骤（如密度梯度离心）来进一步纯化尿液细胞外囊泡，使其免受与尿液细胞外囊泡共分离的高分子量蛋白质复合物（如白蛋白）的污染。该尿EV分离方案，具有高特异性和可重复性。可以研究高度纯化的尿液EV的分子复杂性，支持识别EV特异性功能和生物标志物。
基于线性密度梯度超速离心的尿EV分离方案示意图
参考文献：
Isolation and characterization of urinary extracellular vesicles: implications for biomarker discovery.
Preparation of Multi-omics Grade Extracellular Vesicles by Density-Based Fractionation of Urine.
唾液
用超声前处理唾液和使用碘克沙醇梯度液成功的对唾液EV进行分馏。同时，为了提高样品处理和分析的通量，使用定角转子代替水平转子，将密度梯度离心的时间从17小时减少到4小时，大大缩短了整体的离心操作时间。
基于密度梯度离心的唾液EV分离方案示意图
参考文献：
Isolation of human salivary extracellular vesicles by iodixanol density gradient ultracentrifugation and their characterizations.
Method optimisation to enrich small extracellular vesicles from saliva samples.
眼泪
泪液是外泌体分离合适的来源，因为与血液相比，它们的蛋白质和碎片更少，并且可以无创分离。通过将泪液试纸从双眼收集眼泪。随后，将试纸转移到PBS中，使用差速离心法即可完成外囊泡的纯化，方便进行后续的定量分析。
差速离心泪液EV分离方案示意图
参考文献：
Oncogenic miRNAs Identified in Tear Exosomes From Metastatic Breast Cancer Patients
Role of tear exosomes in the spread of herpes simplex virus type 1 in recurrent herpes simplex keratitis.
Single-particle analysis of tear fluid reveals abundant presence of tissue factor-exposing extracellular vesicles with strong coagulation activity.
脑脊液
脑脊液EV可能既是中枢神经系统通信的中介又是促成者。因此，它们作为中枢神经系统疾病生物标志物的潜力激发了人们对脑脊液EV研究的极大兴奋和关注。
差速离心脑脊液EV分离方案示意图
参考文献：
The morphology and biochemistry of nanostructures provide evidence for synthesis and signaling functions in human cerebrospinal fluid.
Recommendations for reproducibility of cerebrospinal fluid extracellular vesicle studies.
关节液
关节液含有高浓度的高分子量透明质酸，导致其非常粘稠。用透明质酸酶进行滑液预处理，然后通过超速离心来纯化EV，不会形成大量聚集体或损坏EV。
关节液EV分离方案流程图
参考文献：
Synovial fluid pretreatment with hyaluronidase facilitates isolation of CD44+ extracellular vesicles.
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